【摘 要】
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利用短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX染色体DNA为模板,PCR扩增获得几丁质酶基因chiD,并对基因作克隆、测序以及预测分析,预测结果显示几丁质酶基因chiD序列片段为1524 bp,编码由50
【机 构】
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福建省农业科学院农业生物资源研究所福建福州,350003;福建农林大学生命科学学院福建福州,350002福建省农业科学院农业生物资源研究所福建福州,350003福建省农业科学院植物保护研究所福建福州,
【出 处】
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第八届全国芽孢杆菌青年工作者学术研讨会
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利用短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX染色体DNA为模板,PCR扩增获得几丁质酶基因chiD,并对基因作克隆、测序以及预测分析,预测结果显示几丁质酶基因chiD序列片段为1524 bp,编码由507个氨基酸组成的约54.55 kDa蛋白质,且其等电点为5.77,为酸性几丁质酶.将获得的重组质粒双酶切后与表达载体pET28-a连接,构建重组表达载体pET28a-chiD,通过表达载体的诱导表达,结果显示重组蛋白质的分子量为55 kDa,与预测结果一致.利用不同参数包括温度、时间和IPTG浓度诱导表达载体pET28a-chiD表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析,结果显示其诱导表达的最佳参数分别为28℃、8h和0.5 mmol/L.
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