肠胃清对长春新碱诱导的人结肠癌耐药细胞株Y盒结合蛋白核移位及mdr1/P-gp表达增强的影响

来源 :第十一届全国中西医结合肿瘤学术大会暨国际中医、中西医结合肿瘤学术交流大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hammil
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目的:观察肠胃清对长春新碱诱导的人结肠癌耐药细胞株HCT8/V的Y盒结合蛋白核移位、多药耐药基因越出1及P-糖蛋白(P-gp)表达增强的影响,进一步探讨该方逆转肿瘤多药耐药的分子机制。 方法:制备大鼠灌胃后的肠胃清药物血清,以Western blot 方法检测肠胃清药物血清作用下HCT8/V细胞胞浆、胞核Y盒结合蛋白(YB-1)表达情况,EMSA 法分析YB-1与mdr1基因启动子结合活性,RT-PCR检测mdr1、YB-1、多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA转录水平,流式细胞仪检测细胞膜表面P-gp表达。 结果:在1.25%、2.5%、5%药物血清作用下,HCT8/V细胞核内YB-1表达逐渐减弱,细胞质内YB-1表达则逐渐增强:YB-1与mdr1基因启动子结合活性逐渐下降(p<0.01);mdr1 mRNA转录水平逐渐降低(p<0.05或p<0.01),而MRP和YB-1的水平无明显变化(p>0.05);细胞膜表面P-gp表达荧光强度值减弱(p<0.01)。 结论:肠胃清可通过影响耐药细胞YB-1的核移位、降低mdr1/P-gp的表达,逆转结肠癌细胞的耐药。
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