目的：改良法构建二型重组腺相关病毒(rAAV2)介导的金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)构建及鉴定。 方法：采用PCR法从pDNR-LIB质粒种扩增人全长TIMP1基因，利用基因重组的方法将全长TIMP1插入表达质粒pSNAV的多克隆位点，构建成pSNAV-TIMP1；用脂质体转染的方法将重组的质粒转入BHK-21细胞中，G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-TIMP1；用具有rAAV2包装功能的1型单纯疱疹病毒(HSV1-rc/△UL2)感染BHK-TIMP1，纯化后得到rAAV2-TIMP1；采用“一种病毒感染一种载体细胞株”，用“感染”的方式代替传统的“转染”方式，使每个细胞产生的rAAV2-TIMP1比传统方式提高了2个数量级以上。 结果：用改良法成功rAAV2-TIMP1，用PCR检测到目的基因TIMP1，病毒滴度达到1×1012v．g/ml。 结论：构建的rAAV2-TIMP1可望能有效地将TIMP1基因导入人肝癌细胞株，为进一步研究肝癌浸润和转移机理以及探讨抑制肝癌浸润和转移的方法提供实验基础。