单分子荧光成像研究TGF-β信号通路下游蛋白Smad7的抑制机理

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转化生长因子TGF-β信号通路在细胞的组织器官发育、细胞增殖、分化、运动以及凋亡等过程中具有非常重要的调节作用。Smad7作为TGF-β信号的关键负调控因子,能够利用多种分子机制抑制TGF-β信号,从而在TGF-β信号通路相关的疾病的发生与发展中有着非常重要的作用。利用传统的生物学方法,如免疫共沉淀和免疫荧光的方法研究Smad7对TGF-β信号的抑制作用,难以观测Smad7在细胞膜上的动态过程和调控机制。我们采用全内反射荧光成像技术,发展并且建立单分子追踪以及统计方法,通过对细胞膜区的EGFP-Smad7进行活细胞单分子荧光成像,我们实时地观察到在TGF-β信号通路中单个Smad7分子上膜的动态行为,并提出Smad7在细胞膜上的抑制机制。
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