【摘 要】
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目的：探讨MARCO介导的线粒体凋亡在矽肺发病中的作用机制以及信号通路阻断剂对肺纤维化的干预效果.方法：采用人群研究与动物实验相结合的方法,收集矽肺观察对象、不同期别矽肺患者的大容量肺灌洗者的灌洗回收液,分离纯化肺泡巨噬细胞(AM),采用抑制剂法分别在不同环节阻断信号转导,观察MARCO、CytC、Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3表达水平的变化;采用Wistar大鼠建立矽
【机 构】
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新乡医学院公共卫生学院 河北联合大学公共卫生学院
【出 处】
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第十三届全国劳动卫生与职业病学术会议
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目的：探讨MARCO介导的线粒体凋亡在矽肺发病中的作用机制以及信号通路阻断剂对肺纤维化的干预效果.
方法：采用人群研究与动物实验相结合的方法,收集矽肺观察对象、不同期别矽肺患者的大容量肺灌洗者的灌洗回收液,分离纯化肺泡巨噬细胞(AM),采用抑制剂法分别在不同环节阻断信号转导,观察MARCO、CytC、Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3表达水平的变化;采用Wistar大鼠建立矽肺模型,分别进行预防性干预和治疗性干预,观察MARCO、CytC、Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3、Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA、线粒体势能及ROS表达水平的变化以及肺组织纤维化程度的变化.
结果：矽肺患者线粒体通路的相关蛋白Caspase-9、CytC、Caspase-3表达水平均高于观察对象,MARCO、CytC、Caspase-9、Caspase-3的表达水平随着矽肺期别的增加;用酪氨酸激酶抑制剂和活性氧清除剂能够分别抑制下游信号转导后,凋亡标志蛋白Caspase-3表达下调,抗MARCO抗体上调MARCO和Caspase-3的表达;环孢霉素A(CsA)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)、Caspase-8抑制剂和Caspase-9抑制剂在线粒体通路不同的环节可阻断信号的转导,下调Caspase-9、Caspase-3、CytC的表达.大鼠染矽尘后AM表面MARCO、细胞内ROS水平、肺组织内Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA水平、Caspase-3、Caspase-9、Bax/Bcl-2、CytC的表达均较生理盐水对照组正常大鼠升高,线粒体PTP开放程度增大,AM凋亡率上调,肺纤维化程度加重;用多聚鸟苷酸(PolyG)阻断MARCO与二氧化硅的结合,用NAC清除AM内ROS水平、用CsA和Caspase-9抑制剂分别抑制AM内线粒体膜通透性转换孔和Caspase-9后,染矽尘大鼠AM凋亡信号蛋白出现不同程度的下调,肺纤维化程度随之减轻.表明MARCO介导的线粒体凋亡在矽肺发生发展中发挥重要作用;早期采用信号转导抑制剂对染矽尘大鼠进行预防性干预,效果优于矽肺形成后再进行治疗性干预.
结论：MARCO介导的线粒体凋亡在矽肺发病中的发挥重要作用,采用相应的靶点阻断剂可抑制、延缓或逆转肺纤维化的发生发展.
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