【摘 要】
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本文利用环介导恒温扩增(LAMP)技术成功鉴定了赤潮微藻微小原甲藻(Prorocentrum minimum),并对该方法进行了特异性和敏感性验证.特异性检验显示,只有微小原甲藻为阳性扩
【机 构】
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中国水产科学研究院东海水产研究所,农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室,上海200090
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本文利用环介导恒温扩增(LAMP)技术成功鉴定了赤潮微藻微小原甲藻(Prorocentrum minimum),并对该方法进行了特异性和敏感性验证.特异性检验显示,只有微小原甲藻为阳性扩增,其他对照藻类均为阴性反应；敏感性检验表明,LAMP方法的敏感度是常规PCR的10倍,最低检测限仅为3.6 pg DNA.同时,本文在上述研究的基础上进行了初步摸拟现场试验,把培养的微藻进行煮沸后直接作为检测模板,结果显示,只有微小原甲藻模板或者含有该微藻的模板呈现阳性扩增,其他为阴性反应.该方法对反应产物的检测可采用直接观察白色沉淀或者加入SYBR Green Ⅰ染色来确定,省去了繁琐的电泳步骤.本文建立的微小原甲藻LAMP检测方法,特异性好,灵敏度高,检测速度快,整个过程在1个小时内完成,最低检测限度仅几个皮克.因此,该方法不仅可以用于赤潮发生时对赤潮微藻进行快速检测鉴定,而且可在低密度时对该藻进行监控,为赤潮预报预测提供重要的理论参考依据.
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