【摘 要】
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目的:筛选环二鸟苷酸在变异链球菌中可能的受体蛋白并做进一步分析。方法:使用生物素标记的环二鸟苷酸,链霉亲和素磁珠在变异链球菌总蛋白中进行亲和拉下实验,筛选可能的受
【机 构】
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510515广州,南方医科大学南方医院·南方医科大学口腔医学院
【出 处】
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中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十次全国老年口腔医学学术年会
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目的:筛选环二鸟苷酸在变异链球菌中可能的受体蛋白并做进一步分析。方法:使用生物素标记的环二鸟苷酸,链霉亲和素磁珠在变异链球菌总蛋白中进行亲和拉下实验,筛选可能的受体蛋白。对受体蛋白进行生物信息学分析,预测其的结合位点,并用大肠杆菌麦芽糖结合蛋白表达系统表达并纯化后,进行凝胶迁移实验,紫外交联实验验证。结果:亲和拉下实验中筛选出一个可能的受体蛋白EF-TU,表达纯化后的结合实验结果表明其与环二鸟苷酸特异性结合。结论:亲和拉下实验是筛选小分子的受体蛋白的一种有效方法。本研究进一步地阐明了变异链球菌中环二鸟苷酸信号通路的作用靶点和作用机制。
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