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背景:疟疾仍然是世界上危害最为严重的三大传染病之一,疫苗是防治疟疾的理想手段,然而,目前无有效的红外期疟疾亚单位疫苗。环子孢子蛋白CSP(Circumscporozoite protein)是减毒子孢子疫苗的主要保护性抗原,CSP特异的CD8+T细胞是减毒子孢子疫苗的最主要保护性效应分子,因此,诱导CSP特异的CD8+T细胞反应是设计有效疟疾亚单位疫苗的关键。热休克蛋白Gp96作为重要的佐剂,其佐剂效应主要位于N-末端,能将其结合多肽的Gp96能有效地交叉递呈到MHCⅠ,并活化CD8+T细胞。目的:构建Gp96 NTD-CSP重组疟疾DNA疫苗,观察并探讨了该疫苗免疫能否诱导小鼠产生保护性免疫及其效应机制。方法:首先,分别以约氏疟原虫BY265株子孢子c DNA和p FLAG CMV8 gp96为模板,扩增获得CSP和gp96NTD目的片段,成功构建了p FLAG CMV8 gp96NTD-CSP、p FLAG CMV8 gp96NTDSYVPSAEQI(CSP的CD8+T特异表位肽)、p FLAG CMV8 CSP和p FLAG CMV8 gp96NTD重组质粒,按照DNA疫苗免疫方法免疫小鼠;野生子孢子进行攻击后,采用 Real-time PCR和吉氏染色观察被攻击小鼠的肝脏虫荷和原虫血症,探讨免疫小鼠抵御野生子孢子攻击的能力;然后,采用ELISA和ELISPOT分别检测抗环子孢子蛋白(CSP)抗体滴度和CSP特异的CD8+T细胞分泌IFN-γ情况,探讨免疫小鼠保护性免疫的可能机制。结果:核酸疫苗p FLAG CMV8 gp96NTD-CSP免疫小鼠能显著抵御野生子孢子的攻击(gp96NTD-CSP免疫组肝期虫荷与原虫血症与对照组有明显差异,p<0.05),并且能诱导小鼠产生较高的抗体水平和较高的CSP特异的CD8+T细胞频率。结论:p FLAG CMV8 gp96NTD-CSP重组DNA疫苗可能通过诱导小鼠CSP特异抗体和CSP特异的CD8+T细胞的产生,一定程度上抵御野生子孢子的攻击。