为获得哈维弧菌外膜蛋白Ompk亚单位疫苗工厂化生产技术。利用高密度培养,进行不同时间补料和升温诱导表达,测定不同培养方法的菌体量和蛋白诱导表达效果,获得的外膜蛋白分别选用白油和Montanide ISA763A为佐剂制备疫苗,进行质量检验。经5、50、500L发酵罐多批次培养效果比较,采用培养4 h开始补料和6 h开始诱导表达培养,工程菌体和外膜蛋白得率效果最佳,在5、50、500L发酵罐诱导培养菌体得率分别为17.2、14.8、26.6g/L,均高于普通发酵培养的菌体得率(平均得率不到5 g/L),在50、500L发酵罐外膜蛋白得率分别为61.6、198.0 mg/L,高于其它培养方法。获得的外膜蛋白用白油(水相:油相为1:1)和Montanide ISA763A(水相:油相为2:3)为佐剂,制备的三批次疫苗,物理性状、无菌符合质量要求;763A佐剂制备的疫苗安全性符合要求,白油佐剂疫苗安全性有待改进;经石斑鱼、鲫鱼免疫效果试验,符合质量要求。三批次763A佐剂疫苗对石斑鱼的免疫保护率为70.5%、62.5%、66.7%,平均为66.5%,对鲫鱼的免疫保护率为61.9%、75%、75%,平均为70.6%;三批次白油佐剂疫苗对石斑鱼的免疫保护率为82.3%、66.7%、75%,平均为74.6%,对鲫鱼的免疫保护率为71.4%;白油佐剂免疫保护率略高于763A,但安全性不如763A佐剂。初步确定了哈维弧菌重组外膜蛋白OmpK高密度培养和诱导表达的疫苗生产工艺。