缺氧诱导的CEA阳性细胞靶向调控元件荧光素酶报告基因载体的构建

来源 :中华医学会第十七届全国外科学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a1234578
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目的 设计并构建5拷贝缺氧反应元件(5HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合的靶向调控元件荧光素酶报告基因载体.方法 设计引物,通过PCR方法从载体pLEGFP-N1-5HRE-CEAp合成两端含有不同酶切位点的片段5HRE-CEAp及CEAp,将这两个片段通过分子克隆技术分别与荧光素酶报告基因载体pGL4.20重组,构建携带5HRE-CEAp和CEAp的荧光素酶报告基因载体pGL4.20-5HRE-CEAp、pGL4.20-CEAp.通过酶切、电泳及测序鉴定构建的载体.
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目的 观察转移相关基因2(MTA2)在胃癌组织中的表达特征,明确MTA2.表达与核转录因子Spl表达的相关性.方法 采用免疫组织化学染色技术(IHC)和逆转录一聚合酶链式反应(RT.PCR)法,检测83例手术切除的胃癌原发灶和对应癌旁胃黏膜组织中MTA2的表达情况.采用IHC方法检测上述标本中核转录因子Spl的表达.
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