【摘 要】
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目的：比较RT-PCR法和荧光定量PCR法在检测感染肠道病毒EV71的小鼠组织中的分布及含量的优缺点,建立一种可靠的检测方法.
方法：用EV71病毒株Henan1-09-China感染自主构建的S
【机 构】
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中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,北京100050
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目的：比较RT-PCR法和荧光定量PCR法在检测感染肠道病毒EV71的小鼠组织中的分布及含量的优缺点,建立一种可靠的检测方法.
方法：用EV71病毒株Henan1-09-China感染自主构建的SCARB2转基因小鼠,一周后,取小鼠的各组织,提取总RNA检测;从GenBank中查询2-3年流行的EV71河南株VP1区域的基因序列进行比对,设计特异引物及TaqMan探针,通过普通RT-PCR和TaqMan一步法荧光定量PCR分别对样品进行检测,比较两种方法的实际应用价值.
结果：RT-PCR不及TaqMan一步法荧光定量PCR,耗时达4-5小时,重复性较差,灵敏性低,TaqMan一步法荧光定量PCR的耗时为2-3小时,重复性好,灵敏性高.
结论：TaqMan一步法荧光定量PCR方法更适于肠道病毒EV71的快速检测.
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