【摘 要】
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本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针，以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模
【机 构】
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华中农业大学动物医学院 农业微生物学国家重点实验室,武汉 430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会
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本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针，以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模板制作荧光定量PCR标准曲线.用该方法对临床采集的54份血清样品进行检测，并与常规PCR方法进行敏感性和特异性比较，结果显示：所建立的方法灵敏度可达10拷贝·μL-1，比常规PCR方法灵敏度高100倍，并且与猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)没有交叉反应;田间试验表明，54份血清样品中，常规PCR结果显示，50份呈PCR阳性;而荧光定量PCR检测结果显示，52份血清为阳性;其中50份PCR阳性的样品，定量PCR均为阳性.上述结果显示该方法适合用于PCV2的流行病学调查和临床诊断.
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