【摘 要】
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间充质干细胞(MSCs,mesenehymal stem cells)是目前组织工程研究中重要的种子细胞来源,具有广泛的应用前景。本实验中,我们从人胎盘基蜕膜分离得到间充质于细胞(placental decidua basalis-mesenchymal stem cells,PDB-MSCs),并探讨其在低氧无血清培养环境下的牛物学特性。联合运用酶消化和密度梯度离心的方法从人胎盘基蜕膜分离MSC
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室,成都 610041 四川大学华西药学院,成都 610041
【出 处】
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华北地区第十七届职业卫生学术交流会
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间充质干细胞(MSCs,mesenehymal stem cells)是目前组织工程研究中重要的种子细胞来源,具有广泛的应用前景。本实验中,我们从人胎盘基蜕膜分离得到间充质于细胞(placental decidua basalis-mesenchymal stem cells,PDB-MSCs),并探讨其在低氧无血清培养环境下的牛物学特性。联合运用酶消化和密度梯度离心的方法从人胎盘基蜕膜分离MSCs;在体外构建低氧(1%O2)和无血清的培养模型(0%FBS/H-DMEM);利用MTT法、集落形成单位(CFU-F,Colony-forming unit-fibroblast assay)和凋亡流式试剂盒检测PDB-MSCs在低氧无血清环境下的增殖、克隆形成以及凋亡情况。实验发现,PDB-MSCs具有与骨髓MSCs(BM-MSCs,bone marrow derived mesenehymal stem cells)相似的形态特征,为长梭形;同时表达与BM-MSCs相似的细胞表型,并且部分表达SSEA-1,SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81,Oct-4等只存在于胚胎干细胞的相关表型;此外PDB-MSCs可以分化为成骨、成脂和成软骨样细胞,具有多向分化潜能。在96h内PDB-MSCs能较好的耐受低氧无血清的培养环境,与常规培养比,细胞没有发生显著性的凋亡(P>0.05);低氧促进PDB-MSCs增殖和克隆的形成(P<0.01),但PDB-MSCs在低氧无血清的培养环境下,生长缓慢,克隆形成能力明显降低(P<0.01)。总的来说,胎盘是MSCs的一个新来源,优势明显,PDB-MSCs在一定程度上耐受低氧和无血清培养环境,可以作为缺血相关组织工程产品种子细胞的。
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