【摘 要】
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目的:探讨糖尿病甜味剂赤藓糖醇对PC12细胞氧化损伤的保护作用. 方法:10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养PC12细胞于CO2培养箱中培养,取对数生长期细胞进行实验.分别设组:正
【机 构】
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云南中医学院,云南 昆明 650500
【出 处】
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第九届海峡两岸中医药发展与合作研讨会、第十五次全国中医糖尿病大会暨中国针灸学会砭石与刮痧专业委员会年会
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目的:探讨糖尿病甜味剂赤藓糖醇对PC12细胞氧化损伤的保护作用.
方法:10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养PC12细胞于CO2培养箱中培养,取对数生长期细胞进行实验.分别设组:正常组、模型组、阳性对照组、给药组.阳性对照组为160mg·L-1依达拉奉溶液;给药组分别为50mg·L-1、100mg·L-1赤藓糖醇溶液;正常组和模型组给予等量RPMI-1640无血清培养基.继续培养24 h后,除正常组外,其余各组吸弃原培养液,加入含H2O2(终浓度为50μmol·L-1)的无血清培养基损伤细胞2h,弃原培养液,加180 L培养液继续培养42 h后,倒置显微镜下观察各组细胞形态变化.采用MTT比色法,造模损伤恢复培养42 h后,加5 g·L-1的MTT液20 μL,孵育4h,吸弃上清液,加150 μL100%DMSO,摇床上振荡10 min,使结晶物充分融解,570 nm波长下测定各孔吸光度(A).细胞造模处理后,收集细胞培养上清液,测定培养液中LDH活性.细胞造模处理后,收集细胞,测定细胞内GSH的含量.
结果:与正常组比较,模型组细胞数量明显减少,多数细胞突起收回,胞体变圆,部分变圆细胞成团存在,胞体边缘模糊,折光性减弱,贴壁能力降低,培养板底部可见细胞碎片;细胞存活率明显降低,仅为48.6%;细胞内GSH含量明显减少;细胞LDH泄漏量明显增加.与模型组比较,依达拉奉160mg·L-1和赤鲜糖醇50,100mg·L-1浓度下的细胞整体数量和梭形细胞数量增加,成团细胞数减少,细胞折光性和贴壁能力恢复良好.依达拉奉160mg·L-1组提高细胞存活率12%,赤鲜糖醇各给药组均具有提高细胞存活率的趋势,以50mg·L-1具有统计学意义.依达拉奉和赤鲜糖醇各给药组均能提高细胞内GSH含量;并降低细胞LDH泄漏量.
结论:赤鲜糖醇能明显改善氧化损伤后的PC12细胞形态,提高细胞存活率,同时保护细胞膜以降低LDH泄露,提高细胞内GSH含量,提示赤鲜糖醇对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有显著保护作用.
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