【摘 要】
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目的:探讨MAPKs信号通路在MTA诱导人根尖乳头细胞分化过程中的作用。方法:分离培养人根尖乳头细胞(HAPCs);使用MTA条件培养基(0、0.02mg/ml、0.2mg/ml、2mg/ml)诱导HAPCs的分
【机 构】
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山东大学口腔医学院,山东省口腔生物医学重点实验室;
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目的:探讨MAPKs信号通路在MTA诱导人根尖乳头细胞分化过程中的作用。方法:分离培养人根尖乳头细胞(HAPCs);使用MTA条件培养基(0、0.02mg/ml、0.2mg/ml、2mg/ml)诱导HAPCs的分化,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,茜素红染色检测矿化结节的形成;通过real-time PCR检测牙本质特异性标记物牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、成骨相关性转录因子Runx2、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的表达;Western Blot检测Runx2蛋白的表达。应用Western Blot检测MTA刺激HAPCs后MAPKs信号通路蛋白磷酸化水平的变化;在MTA诱导HAPCs分化的同时,分别用20uM浓度的ERK抑制剂U0126和p38MAPK抑制剂SB203580处理细胞.检测ALP活性,通过real-time PCR和Western Blot分别检测DSPP及其他矿化相关基因(Runx2、BSP和OCN)mRNA的表达和Runx2蛋白的表达。结果:MTA诱导后细胞ALP活性增强;矿化结节增多;DSPP、Runx2、BSP、OCN mRNA表达升高;Runx2的蛋白表达量升高。MTA促进ERK和p38的磷酸化,表明MTA可以激活ERK和p38信号通路。抑制ERK和p38的活性后,人根尖乳头细胞ALP活性降低;DSPP、Runx2、BSP和OCN mRNA表达水平下降;Runx2蛋白的表达量也相应降低。结论:MTA促进人根尖乳头细胞的成牙本质/成骨向分化;MTA能够激活HAPCs中ERK和p38信号通路;阻断ERK和p38MAPK信号通路能够抑制MTA诱导的HAPCs成牙本质/成骨向分化。
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