【摘 要】
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目的:探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。
方法:采用干细胞分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞;间接免疫荧光法鉴定诱导前
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院神经病学研究所,重庆400016中南大学湘雅医院儿科,长沙410008
【出 处】
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2003年中国博士后生命科学学术研讨会暨院士论坛
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目的:探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。
方法:采用干细胞分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞;间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞巢蛋白、胰岛素、胰高血糖素、生长押素、Pdx-l的表达;RT-PCR法检测诱导前后细胞巢蛋白、胰岛素-1、葡萄糖转运子-2、葡萄糖激酶及其转录因子Isl-1,Pdx-l,Pax-4,Pax-6等基因mRNA的表达;双硫腙染色鉴定胰岛β细胞;透射电镜观察诱导后细胞超微结构;24h累积分泌量测定和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。
结果:诱导5h巢蛋白阳性细胞为44.6%±7.3%;诱导24h巢蛋白阳性细胞增至61.8%±8.4%。此后,巢蛋白阳性细胞数目开始下降,诱导第14d后,巢蛋白,表达基本消失。与此同时,诱导后的胰岛素分泌的细胞可以表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素、Pdx-1等蛋白;表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2、葡萄糖激酶及其多种转录因子基因mR-NA,DTZ染色呈阳性,超微结构提示有细胞内出现许多分泌小泡,胰岛素分泌量急剧增加,胰岛素刺激实验反应敏感等。而诱导前MSCs不具备上述特点。
结论:大鼠骨髓阃质干细胞体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。
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