【摘 要】
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目的：探讨激酶Dyrk1A抑制剂-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)-对微管相关蛋白tau基因外显子10可变剪接的影响.方法：在HEK293FT共转染mini-tau基因与和Dyrk1A或无激酶活性的
【机 构】
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江苏省神经再生重点实验室,南通大学,江苏,226001
【出 处】
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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：探讨激酶Dyrk1A抑制剂-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)-对微管相关蛋白tau基因外显子10可变剪接的影响.方法：在HEK293FT共转染mini-tau基因与和Dyrk1A或无激酶活性的Dyrk1AK188R、或Dyrk1A的siRNA,用RT-PCR检测tau外显子10的编码；在维甲酸诱导分化的入神经前体细胞中,不同浓度的EGCG处理细胞24小时,用RT-PCR和Western blot检测3R-tau和4R-tau的表达变化.结果：(1)Dyrk1A促进3R-tau表达.在HEK293T细胞中,过表达Dyrk1A明显的抑制tau外显子10的编码,即3R-tau表达增加.SiDyrk1A作用于HEK293FT细胞,则明显观察到3R-tau表达受抑制,4R-tau水平增高.(2)EGCG促进4R-tau的表达.人神经前体细胞经全反式维甲酸诱导分化后,可表达3R-tau和4R-tau,用不同浓度的EGCG处理24小时,发现Dyrk1A表达水平下降,并计算4R-tau和3R-tau的比值,发现其比值随着EGCG浓度升高,说明EGCG促进tau外显子10表达.结论：激酶Dyrk1A在细胞内抑制tau外显子10编码,导致3R-tau水平增加；绿茶提取物EGCG作为激酶Dyrk1A的抑制剂,通过抑制Dyrk1A表达从而促进4R-tau水平增加.为tau可变剪接紊乱相关疾病如Pick病的药物开发利用提供新思路.
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