CUL4B属于Cullin基因家族,该家族成员是泛素E3连接酶CULLIN-RING(CULLIN-RING ubiquitin Ligases,CRLs)的重要组成部分。我们前期的研究结果提示CUL4B在细胞增殖中发挥重要的功能。在此工作基础上,本研究对CUL4B在DNA复制中的作用及其机制进行了探讨。首先我们利用Rea,l-time PCR和Western blot分析方法检测了不同细胞周期CUL4B的表达情况。结果发现在细胞周期的各个时期,CUL4B在mRNA及蛋白表达水平没有明显差别,提示CUL4B表达量不随细胞周期的变化而明显改变。对CUL4B的亚细胞定位检测结果显示CUL4B蛋白在不同的细胞周期都主要分布于细胞核,并且CUL4B与DNA合成位点共定位。利用DNA fiber技术我们分析了CUL4B对DNA复制动力学的影响,结果发现抑制CUL4B表达可导致DNA复制起始障碍。进一步的研究显示CUL4B能够通过调控细胞内CDC6蛋白降解而参与调控前复制起始复合物的组装。此外,CUL4B对CDC6的调控不依赖于其与DDB1的结合以及其羧基末端。有趣的是,我们发现尽管CUL4A与CUL4B高度同源,但CUL4A并不能拯救细胞因CUL4B缺乏导致的核内CDC6的降解,提示两者在DNA调控中发挥不同的功能。