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大豆异黄酮(soybean isoflavones,SI)是一类从大豆中分离提取出的、具有多酚结构的化合物,它的母体为3-苯基苯并吡喃酮.目前发现的大豆异黄酮共有12种,主要分为结合型糖甙和游离型甙元,游离型甙元有三种,分别为三羟基异黄酮(genistein)、二羟基异黄酮(daidzein)及6-甲氧基异黄酮(glycitein).本研究以genistein和daidzein为对象,探讨其对离体培养猪氧化肝细胞抗氧化功能的影响.试验所用的肝细胞来源于3日龄的杜×(长×大)仔猪,培养基为DMEM/F 12,其中添加10%的胎牛血清和100U/ml青-链霉素,待细胞生长3d后,加入Fe2-/H2O2进行氧化处理建立氧化模型.试验共设10个处理,分别是:空白对照组(未进行氧化处理)、氧化对照组及在氧化对照组基础上分别添加10、20、40、80μmol/L genistein和daidzein.继续培养12h后测定培养上清液中总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物岐化酶(T-SOD)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化.实验结果表明:正常对照组培养上清液中T-AOC比氧化对照组高25.62%,添加不同浓度genistein和daidzein肝细胞培养上清液中T-AOC与正常及氧化对照组相比无显著差异(p<0.05),但是从具体测值看,随着genistein和daidzein浓度的加大,T-AOC增强;正常对照组T-SOD活性是氧化对照组的1.38倍(p<0.01),添加10μmol/L genistein组T-SOD活性显著高于氧化对照组与80μmol/L genistein组(p<0.01),添加10、20μmol/L daidzein组与氧化对照组、80μmol/L daidzein组相比,差异极显著(p<0.01),表现出随着genistein和daidzein浓度的加大,T-SOD活性呈下降趋势;氧化对照组培养上清液中CK含量是正常对照组的2.28倍(p<0.05),添加genistein和daidzein可不同程度减少CK释放进入培养液;正常对照组培养上清液中LDH含量只是氧化对照组的13.91%,20、40、80μmol/L genistein组LDH含量显著低于氧化对照组(p<0.01),随着添加浓度的增大,LDH含量呈下降趋势,添加daidzein各组与氧化对照组相比,降低LDH含量,且差异极显著(p<0.01).上述结果说明,Fe2+/H2O2氧化处理严重损伤肝细胞细胞膜,使细胞内CK与LDH释放进入培养液,添加genistein和daidzein可以降低细胞膜损伤,提高氧化肝细胞培养上清液T-SOD活性,增强细胞抗氧化能力.