四川山地乌骨鸡白细胞介素16基因克隆测序及真核表达质粒构建

来源 :中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangking88
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本研究根据Genbank中鸡IL-16序列设计引物对,采用RT-PCR法从四川山地乌骨鸡脾淋巴细胞RNA中扩增得到CHIL-16基因,将其克隆到PMD18-T载体,并进行了序列测定分析.结果表明:该克隆的cDNA包括全长开放阅读框为1824bp,编码608个氨基酸.与Genebank已报道的鸡的IL-16序列相比较,二者核苷酸序列的同源性为99.2%-99.7%,共有5-7个碱基发生变异.与鸭子IL-16核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分别为86.1%和85.5%-85.7%.该基因经BamHI和EcoR V双酶切后,插入同样经BamHI和EcoR V双酶切真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了真核表达质粒pcDNA-IL-16.
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