【摘 要】
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目的：研究人三种消化道肿瘤肿瘤球细胞的生物学特性及裸小鼠移植瘤模型.方法：将培养在SSM中的人消化道肿瘤细胞ccl227 、ccl187及HGC27移入含有碱性成纤维生长因子(bFGF)的
【机 构】
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中国医科大学实验动物学部,沈阳110001
【出 处】
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2013‘第十一届中国北方实验动物科技年会
论文部分内容阅读
目的：研究人三种消化道肿瘤肿瘤球细胞的生物学特性及裸小鼠移植瘤模型.方法：将培养在SSM中的人消化道肿瘤细胞ccl227 、ccl187及HGC27移入含有碱性成纤维生长因子(bFGF)的SFM中接种在低吸附6孔培养板,培养和观察肿瘤球的生长情况.将肿瘤球移回到SSM中接种在培养皿中,研究肿瘤球的分化特点.取对数生长期的肿瘤细胞,弃去培养液,加入含有2％FBS的DMEM培养液2ml,再加入Hoechst33342至终浓度为5μg/ml,37℃避光孵育90min.PBS冲洗2次,加入含2％FBS的DMEM培养液2ml,于倒置荧光显微镜下观察,观察SP细胞.96孔板接种检测三种肿瘤细胞和肿瘤球细胞的克隆形成率.将不同数量级的肿瘤细胞和肿瘤球细胞分别接种于裸小鼠,观察移植瘤形成.结果：三种肿瘤细胞用SSM培养液在玻璃培养瓶中培养时,细胞呈均匀的贴壁生长状态,在SFM及低吸附的培养条件下,观察到了ccl227、ccl187及HGC27肿瘤球的形成,呈悬浮状态,细胞圆而小.在紫外光激发下,于荧光显微镜下观察可见大部分细胞胞核被Hoechst33342染色呈现蓝色荧光,少部分细胞胞核蓝光较弱,在明视场下可见这些细胞的轮廓,这类细胞即为SP细胞.被移回到SSM中的肿瘤球,细胞逐渐贴壁、伸展.三种肿瘤的肿瘤球细胞克隆形成率均高于肿瘤细胞.在裸小鼠移植中,肿瘤细胞产生移植瘤需要高于106个细胞,而肿瘤球细胞产生移植瘤仅需103个细胞.结论：在SFM培养条件下,人消化道肿瘤ccl227、ccl1 87及HGC27细胞肿瘤球细胞可富集,肿瘤球细胞具有干细胞特性,血清可促进肿瘤球细胞分化.肿瘤球细胞比非肿瘤球细胞具有更强的致瘤性.
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