【摘 要】
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目的 探讨CaMK-Ⅱ和PP2A 在三氯化铝致SH-SY5Y 细胞tau 蛋白异常磷酸化中的作用.方法 选取SH-SY5Y 细胞进行染毒,实验分组分为对照组、200μmol/LAlCl3 组、400μmol/LAlCl3 组、800μmol/LAlCl3 组,染毒48 小时测定指标.采用CCK-8法测定细胞活力;用流式细胞术测定细胞内Ca2+浓度;用ELISA方法测定CaM 含量、CaMK-Ⅱ含量
【机 构】
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山西医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室 中铁三局集团疾病控制中心
【出 处】
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第十四届全国劳动卫生与职业病学术会议
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目的 探讨CaMK-Ⅱ和PP2A 在三氯化铝致SH-SY5Y 细胞tau 蛋白异常磷酸化中的作用.方法 选取SH-SY5Y 细胞进行染毒,实验分组分为对照组、200μmol/LAlCl3 组、400μmol/LAlCl3 组、800μmol/LAlCl3 组,染毒48 小时测定指标.采用CCK-8法测定细胞活力;用流式细胞术测定细胞内Ca2+浓度;用ELISA方法测定CaM 含量、CaMK-Ⅱ含量、PP-2A 含量;用Western-blot 检测细胞P-tau181、231、262、396 及tau5 表达.结果 细胞活力测定结果显示,400μmol/LAlCl3 和800μmol/LAlCl3 组细胞活力显著低于对照组(P<0.05);细胞内Ca2+浓度显示400μmol/LAlCl3 和800μmol/LAlCl3 组细胞内Ca2+浓度显著高于对照组(P<0.05);ELISA 实验结果显示400μmol/LAlCl3 和800μmol/LAlCl3 组CaM、CaMK-Ⅱ含量明显高于对照组(P <0.05),PP2A 含量明显低于对照组(P <0.05).Western-Blot 结果显示200μmol/L AlCl3、400μmol/L AlCl3、800μmol/L AlCl3 组P-tau181、231、396 和tau5 蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05),800μmol/L AlCl3组P-tau262 蛋白表达显著高于对照组(P<0.05).结论 三氯化铝可导致SH-SY5Y细胞tau 蛋白磷酸化水平升高,其可能与由Ca2+/CaM 调控的CaMK-Ⅱ和PP2A 活性的变化有关.
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