研究脉冲场凝胶电泳技术制备洛氏鱥全基因组DNA的最佳条件

来源 :中国水产学会水产生物技术专业委员会2013年年会暨水产生物技术与现代渔业学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czd1986624
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  在提取基因的实验过程中,通常用普通的琼脂糖凝胶电泳观察所提取的基因大小.但大于10kb的DNA分子在普通的琼脂糖凝胶电泳中的移动速度十分接近很难形成明显的可区分的条带.所以提取全基因组时,应用脉冲场凝胶电泳技术观察所提基因组大小.试验采用洛氏鱥肌肉为材料,研究脉冲场凝胶电泳技术在制备高分子量基因组DNA时的最佳条件.结果表明:采用1%琼脂糖凝胶,电泳温度控制在14℃,电压4V/cm,起始脉冲为1s,终止脉冲为40s,脉冲角度120°,循环泵速度为70 L/min,电泳18h.能获得1000kb的基因组DNA,满足基因组文库构建的需要.
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