【摘 要】
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本研究分别以真核表达质粒pVAX1-PreBovlFN-γ和纯化的原核表达融合蛋白rHis-BovlFN-γ为免疫原,并以纯化的融合蛋白rGST-BovlFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出4株稳定分泌抗rBovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,分别命名为4C7、3H5、2D9、3E4,免疫球蛋白亚类鉴定依次为IgM、IgG2b、IgG1、IgM,杂交瘤培养上清间接ELISA效价为1:1
【机 构】
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扬州大学生物科学与技术学院人兽共患病学与免疫学研究室,江苏,扬州,225009 上海市畜牧兽医站,
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
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本研究分别以真核表达质粒pVAX1-PreBovlFN-γ和纯化的原核表达融合蛋白rHis-BovlFN-γ为免疫原,并以纯化的融合蛋白rGST-BovlFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出4株稳定分泌抗rBovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,分别命名为4C7、3H5、2D9、3E4,免疫球蛋白亚类鉴定依次为IgM、IgG2b、IgG1、IgM,杂交瘤培养上清间接ELISA效价为1:1600、1:3200、1:1600、1:1600,腹水效价为1:25600、1:51200、1:25600、1:12800,Western-blotting分析显示,4株单抗均能特异性结合22kD的rHIS-BovlFN-γ和42kD的rGST-BovlFN-γ,Dot-ELISA试验表明,4株单抗只与融合蛋白rHIS-BovlFN-γ和rGST-BovlFN-γ反应,而不与rHIS-ChIFN-γ、rGST-ChIFN-γ、rHIS-ChlL-2反应,表明4株单抗均为针对rBovlFN-γ的特异性单抗.本研究为进一步研究rBovlFN一γ单抗在研究牛免疫细胞功能、牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定了基础.
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从新疆采取了8个地方绵羊品种的血液样品171份,提取绵羊基因组DNA,用PCR方法扩增绵羊PrP基因,通过序列测定,对它们的PrP基囚型进行研究,确定了PrP基因136、154、171位编码子的多态性为136(A/A),154(H/R)和171(Q/R/H/K),结果发现所检测的新疆地方绵羊品种PrP基因136位密码子均为A,其基因型均为A型痒病抵抗性基因型。
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