【摘 要】
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目的：1.比较rnc突变株与vicK/X/KX突变株的一系列生物学特性,分析它们对多糖代谢相关基因表达水平的影响；2.分析rnc基因与vicRKX信号转导通路间是否存在相互作用及其模式；3.对rnc基因调节vicRKX信号转导系统的模式进行初步验证.方法：1.构建变异链球菌vicK/X/KX基因的失活突变株,rnc基因过表达株,及Smurnc补偿株；2.比较变异链球菌UA159,Smurnc,Sm
【机 构】
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口腔疾病研究国家重点实验室,四川大学华西口腔医院预防科 口腔疾病研究国家重点实验室,四川大学华西口
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目的：1.比较rnc突变株与vicK/X/KX突变株的一系列生物学特性,分析它们对多糖代谢相关基因表达水平的影响；2.分析rnc基因与vicRKX信号转导通路间是否存在相互作用及其模式；3.对rnc基因调节vicRKX信号转导系统的模式进行初步验证.方法：1.构建变异链球菌vicK/X/KX基因的失活突变株,rnc基因过表达株,及Smurnc补偿株；2.比较变异链球菌UA159,Smurnc,Smurnc+,Smurnc补偿菌株和空白对照,vicK/X/KX基因突变株,在细菌形态、生长特性、生物膜形成和胞外多糖产生方面的差异；3.RT-PCR检测Smurnc,Smurnc+,vicK/X/KX基因突变时变异链球菌胞外多糖相关调控基因转录水平表达变化；4.采用sRNA测序,靶基因预测,分析Smurnc与UA159间sRNA表达差异,及rnc基因对vicRKX信号通路的影响是否与sRNA相关.结果：1.成功构建了变异链球菌UA159的rinc基因过表达株,以及i-nc补偿株,vicK和vicKX基因缺失突变株；2.rnc基因能影响变链UA159致龋相关毒力因子——胞外多糖的多个基因表达,对胞外多糖起调控作用；3.rnc基因缺失时,vicR、K、X基因表达上调,rrnc基因高表达时,vicR基因表达下调,vicX基因表达上调,vicK基因表达有上调的趋势；4.rnc基因缺失后,有4669个sRNA表达下调,143个sRNA表达上调,表达变化的sRNA靶基因包括vicR/K/X.结论：rnc对变异链球菌多种毒力因子,尤其是多糖有调控作用,其机制可能是通过对vicRKX信号通路的调节进行,而rnc基因对vicRKX的影响可能与sRNA相关.
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