运动对骨骼肌氧化应激及自噬相关基因表达的时相性影响

来源 :2012年中国运动生理生化学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong464
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  目的:通过建立急性递增运动的时相性模型,检测ICR小鼠骨骼肌氧化应激情况以及Beclin1、Atg9、Atg7和LC-3等自噬关键基因表达水平的时相性变化,探究急性递增运动诱导的骨骼肌氧化应激与细胞自噬的相关性.方法:40只健康雄性ICR小鼠,7~8周龄,体重19 ~21g,随机分为安静组(R)、急性递增运动45 min(E45)、90min(E90)、120min(E120)和150min(E150)组,各组均8只.小鼠进行适应性跑台运动,坡度为0°,速度0.8km/h,持续时间5min,共训练3天.正式运动按照如下程序进行:第1级负荷:1km/h,15min;第2级负荷:1.2km/h,15min;第3级负荷:1.4~1.5km/h,各组分别运动到相应时间点.安静组于安静状态、运动组于运动中相应时间点即刻断颈椎处死,并迅速取出完整的下肢腓肠肌,液氮速冻.酶标仪测定骨骼肌MDA含量、SOD活性和H2O2浓度变化并进行比较分析.实时荧光定量PCR检测小鼠骨骼肌Beclin1、Atg9、Atg7和LC-3基因表达水平.实验数据分析采用SPSS统计软件进行独立样本t检验和单因素方差分析.结果采用-x±S形式表示,显著性水平为P<0.05,非常显著性水平为P<0.01.结果:1)骨骼肌MDA含量和H2O2浓度均在急性递增运动早期急剧上升,在45min时与安静组相比具有显著性差异(P<0.05),这种高水平状态维持一段时间后又开始稳步下降,直到运动结束.而骨骼肌SOD活性却呈现出与其基本相反的变化态势.2)骨骼肌Beclin1、Atg9和Atg7 mRNA表达水平在急性递增运动早期稳步上升,在90min左右时达到峰值并维持一段时间,随后又呈现稳步下降态势.3)急性递增运动不同时相骨骼肌LC3 mRNA表达水平与安静组相比均未见显著性差异(P>0.05).结论:1)急性递增运动诱导的骨骼肌氧化应激可上调细胞自噬水平,但其应答反应却具有延迟性.2)自噬的激活对骨骼肌氧化应激具有负反馈调节作用,可能导致急性递增运动后期骨骼肌氧化应激水平的下降,减轻细胞氧化损伤,并使该阶段自噬水平同步降低,提示自噬在运动性氧化应激过程中是细胞的一种自我保护机制.3)急性递增运动不同时相骨骼肌LC-3mRNA表达水平均未见显著变化,提示自噬活性增强时,LC-3在基因总表达水平上可能并无显著增加.
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