鉴别NADC30-like PRRSV、HP-PRRSV及Classical PRRSV的RT-PCR诊断方法的建立及应用

来源 :第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangwansheng123
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  根据GenBank 登录的类NADC30(NADC30-like)、高致病性(highly pathogenic,HP)与经典(Classical)PRRSV Nsp2 基因序列,设计了1 对引物,建立一步鉴别诊断NADC30-like、HP 及Classical PRRSV 的RT-PCR 检测方法.结果表明,该方法能从NADC30-like、HP 及Classical PRRSV 基因组中分别扩增出628,931,1021bp 的特异性片段,病毒基因组混合后能够同时扩增.敏感性试验结果表明该方法能检测分别检测到0.54,5.17,9.25pg 的核酸含量;特异性结果表明该方法在同等条件下检测PRV、CSFV、PCV2、JEV、PEDV、TGEV、RV、SIV 均为阴性.对2014-2016 年采集的396 份临床样品进行检测,27 份为NADC30-like PRRSV,74 份为HP-PRRSV,5 份为Classical PRRSV.本研究建立的RT-PCR 诊断方法,具有特异、灵敏、快速等特点,可用于一步区分NADC30-like、HP 及Classical PRRSV,为进一步的PRRS 流行病学研究提供了重要的技术手段.
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