骨髓间充质干细胞移植对苯中毒模型小鼠造血损伤的修复作用

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aaa110122
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  [目的]近年来我国职业性苯中毒发病率一直高居急慢性职业中毒的前位.长期的苯接触以造血系统的损害为主,早期表现为单一的外周血细胞减少,到重度苯中毒可导致再生障碍性贫血、全血细胞减少症,严重危害劳动者的健康与生命.本研究拟用苯中毒小鼠模型,研究骨髓间充质干细胞(BMSC)对苯中毒引起的造血损伤的影响,以明确BMSC与造血系统的关系,探索BMSC在苯中毒导致的造血损伤疾病中的治疗作用.[材料和方法]将BMSC供体小鼠,摘眼球放血,颈椎脱臼处死,收获骨髓细胞,制成单细胞悬液进行培养.待细胞融合至80%~90%开始传代,取第3~5代细胞进行实验.40只无特定病原体(SPF)昆明种小鼠,每周3次(周一、周三、周五)于小鼠背部皮下注射苯/油混合液4 ml/kg(苯与橄榄油1∶1混合),连续注射8周,每周称重小鼠1次,根据体重的变化调整注射剂量,建立苯诱导小鼠造血系统损伤模型.将40只苯中毒小鼠随机分为2组:生理盐水治疗组、BMSC治疗组.BMSC治疗组:每周1次经小鼠尾静脉注射BMSC 1×106个细胞,治疗2周,疗程结束后取样,进行小鼠血常规测定、骨髓涂片细胞学检查和脾脏系数检测.[结果]BMSC表面标志物经流式细胞仪分析显示,分离纯化后得到的细胞高表达CD29 (100%)、CD44 (100%)、CD90 (99.9%)和CD105 (76.0%),不表达CD34(0.1%)和CD45(0.9%),提示所得贴壁细胞为MSC,表达MSC细胞特异性抗原标志而不表达造血干细胞、内皮细胞特异性抗原.通过苯诱导成功建立小鼠造血系统损伤模型, 经BMSC治疗后小鼠一般状态明显好于生理盐水治疗组,外周血白细胞(7.32±2.17)、血小板(1026.84±147)明显增多,差异有统计学意义;BMSC治疗后小鼠骨髓各类造血祖细胞形成数量与生理盐水治疗组相比,BMSC治疗组的粒单核系造血祖细胞(72.0±6.8)增多,差异有统计学意义.[结论]在本实验条件下,成功构建苯中毒小鼠模型;应用本研究建立的BMSC培养方法获得的MSC,保持了其表面标志的生物学特性,BMSC移植治疗对苯中毒小鼠的造血损伤具有一定修复价值,为苯中毒引起的造血损伤治疗提供新的思路和方法.
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