【摘 要】
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目的 研究制备的载抗ICAM-1单抗的靶向微泡造影剂在体外及体内的靶向能力.方法 构建ICAM-1质粒,对其进行扩增以及提取之后检测提取质粒的浓度、进行酶切电泳并对构建质粒进行测序；体外培养Hela细胞,脂质体转染法将ICAM-1质粒转染进细胞,使Hela细胞表达ICAM-1表面抗原；并在显微镜下观察转染成功后Hela细胞与靶向微泡的结合情况.通过对家兔左侧跟腱注射Ⅰ型胶原酶制造家兔跟腱模型,另一
【机 构】
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518036深圳市,北京大学深圳医院超声影像科
【出 处】
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第三届全国暨国际超声分子影像及生物效应和治疗学术会议
论文部分内容阅读
目的 研究制备的载抗ICAM-1单抗的靶向微泡造影剂在体外及体内的靶向能力.方法 构建ICAM-1质粒,对其进行扩增以及提取之后检测提取质粒的浓度、进行酶切电泳并对构建质粒进行测序；体外培养Hela细胞,脂质体转染法将ICAM-1质粒转染进细胞,使Hela细胞表达ICAM-1表面抗原；并在显微镜下观察转染成功后Hela细胞与靶向微泡的结合情况.通过对家兔左侧跟腱注射Ⅰ型胶原酶制造家兔跟腱模型,另一侧跟腱注射等量生理盐水作为对照组,1周后观察家兔的大体情况,10天后超声观察双侧跟腱情况并用第一部分制备成功的三种微泡对跟腱进行超声造影检查,观察对比双侧跟腱超声造影增强情况；对双侧跟腱进行苏木素-伊红(H-E)染色、免疫组化法观察跟腱病理情况.结果 ICAM-1质粒的酶切电泳以及测序正确,提取到的质粒浓度为592.8ng/μ1；荧光下可见转染后的Hela细胞表达绿色荧光；显微镜下可见到靶向微泡与转染后的Hela细胞结合,靶向微泡环绕在Hela细胞周围.家兔造模1周后,左侧跟腱出现红肿以及左下肢跛行,右侧跟腱未见明显异常；造模10天后进行超声检查,家兔左侧跟腱内部回声不均,左侧跟腱厚约(2.23±0.15)mm,右侧跟腱回声尚均匀,右侧跟腱厚度约(1.77±0.08)mm；超声造影观察：普通脂质微泡造影剂、生物素化脂质微泡造影剂对家兔双侧跟腱造影均呈微弱增强,载抗ICAM-1单抗的靶向超声微泡造影剂对家兔右侧跟腱呈微弱增强,对左侧跟腱呈高增强；跟腱病理显示左侧跟腱新生血管增多,胶原纤维排列疏松、紊乱,左侧跟腱表达ICAM-1细胞数目达(34.8±3.9)个,右侧跟腱血管无明显增多,胶原纤维排列整齐,表达ICAM-1细胞数目为(6.2±1.8)个,两者比较具有显著性差异(P＜0.05).结论 采用生物素-亲和素桥接法制备的载抗ICAM-1单抗的靶向微泡造影剂在体外能够靶向黏附在表达ICAM-1的Hela细胞表面；在体内能够靶向黏附并显影家兔跟腱炎症区域,为以后靶向诊断和治疗跟腱炎提供了实验基础.
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