【摘 要】
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目的 探讨4-苯基丁酸(4-PBA)在棕榈酸引起的内质网应激导致的胰岛β细胞凋亡中的保护机制.方法 RINm5F大鼠胰岛β细胞系在基础培养液孵育24 h后,换无糖培养继续孵育24 h,然后加入棕榈酸及(或)不同浓度4-PBA共孵育24 h(4-PBA:2.5、5及10 mmol/L).利用TRIzol处理细胞,提取胰岛β细胞的总RNA,并用蛋白裂解液裂解细胞提取总蛋白.实时荧光定量PCR(real
【机 构】
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北京协和医院内分泌科 河北省秦皇岛第三人民医院药剂科
【出 处】
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中华医学会糖尿病学分会第十九次全国学术会议
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目的 探讨4-苯基丁酸(4-PBA)在棕榈酸引起的内质网应激导致的胰岛β细胞凋亡中的保护机制.方法 RINm5F大鼠胰岛β细胞系在基础培养液孵育24 h后,换无糖培养继续孵育24 h,然后加入棕榈酸及(或)不同浓度4-PBA共孵育24 h(4-PBA:2.5、5及10 mmol/L).利用TRIzol处理细胞,提取胰岛β细胞的总RNA,并用蛋白裂解液裂解细胞提取总蛋白.实时荧光定量PCR(real time PCR)检测内质网应激相关基因GRP78、CHOP及细胞凋亡相关基因Caspase3、Bax及Bcl-2的表达.Western blotting测定GRP78、CHOP、Caspase3、Bax及Bcl-2蛋白的表达.CCK-8测定细胞的增殖.
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