血管紧张素(1-7)通过调节氧化还原反应抑制NALP3炎症体激活从而减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化

来源 :广东省医学会第十八次呼吸病学学术会议暨2015岭南呼吸论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lszh123321
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  目的 通过研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素(1-7)(Ang(1-7))对博来霉素(BLM)诱导大鼠肺纤维化模型炎症水平的影响,探讨AngⅡ和Ang(1-7)对肺纤维化的影响机制.材料与方法 24只雄性wistar大鼠随机分成control组、BLM组、BLM+AngⅡ组、BLM+Ang(1-7)组,每组6只,Control组予以气管内滴入生理盐水200μl,BLM组气管内滴入博来霉素(5mg/kg),BLM+AngⅡ组在气管内滴注博来霉素后于皮下微量泵持续注射AngⅡ(25 μ g.kg1-.h-1),BLM+Ang(1-7)组气管内滴注博来霉素后于皮下微量泵持续注射Ang(1-7)(25 μg.kg-1.h-1).4周后取大鼠肺组织进行病理学检测,检测GSH和H2O2水平,western blotting检测NOX4,α-collagen Ⅰ,NLRP3,caspase1、IL1β及胞核Nrf2的蛋白表达量.对肺组织切片分别进行NLRP3和α-SMA,NOX4和α-SMA,NOX4和NLRP3的免疫荧光双染并用激光共聚焦显微镜观察.结果 BLM组肺组织中H2O2含量、NOX4和collagen、α-SMA蛋白表达明显高于对照组, BLM+AngⅡ组上述氧化性指标(H2O2、NOX4)和纤维化指标(collagen、α-SMA)较BLM组明显增高,而BLM+Ang(1-7)组上述指标较BLM组均明显降低(均p<0.05).BLM组和BLM+AngⅡ组GSH水平显著降低,Nrf2和GCLC蛋白表达量明显增加;与BLM组相比,加入Ang(1-7)后其还原水平(GSH含量)和抗氧化能力(Nrf2、GCLC蛋白)均明显增高(p<0.05).BLM组的炎症小体成分NALP3、caspase1 p10、cleave-IL1 β蛋白表达明显高于对照组,BLM+AngII组的炎症小体各组分较BLM组增加更为明显,而加入Ang(1-7)处理后炎症体各组分蛋白表达均显著下降.免疫荧光双染显示与对照组相比,BLM组NLRP3和α-SMA,NOX4和α-SMA,NOX4和NLRP3的蛋白表达量明显增多且蛋白间的共定位增加,BLM+AngII组更甚,而BLM+Ang(1-7)组则较BLM组明显降低,提示AngⅡ可诱导大鼠肺组织产生NOX4,激活NALP3炎症体,而Ang(1-7)则可通过抑制NOX4的产生从而抑制NALP3炎症体的激活.结论 AngⅡ通过诱导氧化反应激活NALP3炎症体,而Ang(1-7)则可抑制AngⅡ的上述反应,诱导抗氧化从而抑制纤维化的发生.
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