【摘 要】
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本试验旨在研究添加不同浓度的亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白合成相关基因表达的影响.选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不合有亮氨酸的培养基(0.00
【机 构】
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吉林大学动物科技学院,长春130062
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本试验旨在研究添加不同浓度的亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白合成相关基因表达的影响.选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不合有亮氨酸的培养基(0.00mM/L)为对照组(0×),试验组培养基分别添加0.1125mM/L(0.25×组),0.225mM/L(0.5×组),0.45 mM/L(1×组),0.9 mM/L(2×组),1.8mM/L(4×组),3.6 mM/L(8×组),7.2 mM/L(16×组),14.4 mM/L(32×组)的亮氨酸.结果表明:亮氨酸能够促进乳腺上皮细胞的增殖.24h和48h时,0.25×组与对照组相比差异不显著(P>0.05),其余各组与对照组差异显著(P<0.05).72h时,各组均与对照组相比差异显著(P<0.05),其中2×组的促增殖作用最强.亮氨酸能够促进雷帕霉素靶蛋白(mTOR),核糖体蛋白S6激酶(S6K1)、蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、转录激活因子5(STAT5)和κ-酪蛋白(CSN3)基因的表达,抑制4EBP1基因的表达.其中2×组对mTOR,S6K1,JAK2,STAT5和CSN3基因的上调表达最强,而对4EBP1基因的下调表达最强.总之,添加亮氨酸能够促进奶牛乳腺上皮细胞增殖和κ-酪蛋白合成相关基因表达,亮氨酸添加量为0.9 mM/L时,其促进作用均达到最大.
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