【摘 要】
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为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤匍胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三纳还原法制备颗拉大小为30nm肢体金,再用胶体盒标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫兔疫检测试纸条.经测试该检测试纸条
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院,南宁530005;河南省动物疫病预防控制中心,郑州450008 广西大学
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
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为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤匍胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三纳还原法制备颗拉大小为30nm肢体金,再用胶体盒标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫兔疫检测试纸条.经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫VSG抗原均无交叉反应,特异性较好.采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62％.结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测检测大片形吸虫.
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