纳米银对中国仓鼠肺细胞的细胞毒性和遗传毒性

来源 :中国环境诱变剂学会致突变、致畸学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yijiezhented
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  背景与目的 研究纳米银对中国仓鼠肺细胞(CHL)的细胞毒性和遗传毒性并探求机制.材料与方法 1.以梯度浓度纳米银(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0 μ g/ml)染毒CHL细胞24h,观察细胞形态变化,MTT比色法计算IC50以评估纳米银细胞毒性水平.2.选取近IC50值(22.0 μ g/ml)作为受试浓度,利用PI染色法分析染毒3h、6h、12h、24h和48h后CHL细胞周期变化并计算细胞增殖指数(PI=(S+G2/M)/(G0/G1 +S+G2/M));采用Annexin V-FITC和PI双染检测前述时间点下的细胞凋亡和坏死发生率,同时记录FSC和SSC信号值的变化情况.3.以梯度浓度(11.0、22.0和44.0 μ g/ml)纳米银染毒CHL细胞24h,收获中期分裂相并用Giemsa染色进行镜检,统计染色体结构和数目畸变发生率.结果 1.纳米银与CHL细胞接触后,光镜下(400×)可见细胞出现空泡化,毒性水平与纳米银浓度呈现正相关,根据改良的Kaber公式计算IC50值为21.68 μ g/ml.2.在测试的各时间点纳米银处理组的G2/M期细胞比例均显著高于对照组(P<0.01),对G0/G1期、S期的变化情况也有显著影响;对照组细胞增殖指数在24h和48h均明显下降,此时纳米银处理组细胞增殖指数也略有下降但幅度远低于对照组;24h以内纳米银处理组凋亡和坏死细胞比例未明显区别于对照组,染毒24h凋亡细胞急剧增加——早、晚期凋亡细胞均增加3倍左右,坏死细胞比例也明显上升,与对照组比较均有显著差异(P<0.01),染毒至48h早、晚期凋亡发生率较24h略有下降,但与对照组比较仍有显著差异(P<0.01),坏死细胞比例则持续上升(约为24h时的5.7倍),与对照组比较有显著差异(P<0.01);纳米银处理组的CHL细胞群SSC信号较对照组显著增强,间接反映染毒过程中细胞可将纳米银的摄入胞浆内.3.各测试浓度纳米银诱导染色体结构畸变均大于5%,中高浓度四倍体发生率达到溶剂对照组的10倍以上;阳性对照品丝裂霉素C (0.25μg/ml)在相同实验条件下诱发CHL细胞染色体结构、数目畸变率明显增加.结论 纳米银对CHL细胞有显著的细胞毒性和遗传毒性,线粒体功能受损、细胞凋亡在纳米银的细胞毒性和遗传毒性中起到不可或缺的作用.
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