【摘 要】
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目的:探讨曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对肝癌细胞Bel7402增殖凋亡的影响,并初步探讨
【机 构】
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海南医学院肿瘤发生和干预重点实验室;分子生物学重点实验室海南医学院肿瘤发生和干预重点实验室;病理生理学教研室海南医学院生理学教研室海南医学院肿瘤发生和干预重点实验室;分子生物学重点实验室;肿瘤研究所海
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目的:探讨曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对肝癌细胞Bel7402增殖凋亡的影响,并初步探讨其可能机制.
方法:采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)染色法分别检测TSA、TRAIL及低浓度TSA联合TRAIL处理Bel7402细胞的生长抑制率;4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色法对药物联合处理后细胞进行凋亡形态学观察;免疫细胞化学和Western blot技术观察药物联合作用后p65蛋白在细胞中表达和定位的变化.
结果:MTT结果显示,不同浓度TSA作用6h、12h、24h对人肝癌细胞的增殖没有明显抑制作用,而作用48h后细胞增殖抑制率明显升高,呈一定的时间依赖性;不同浓度TRAIL处理Bel7402细胞存活率没有明显改变;低浓度TSA(20ng/ml)预处理能够增加Bel7402细胞对TRAIL治疗的敏感性,与对照组相比,TSA预处理联合TRAIL(100ng/ml)作用细胞24h后,细胞的增殖抑制率和单独药物处理组比较有统计学差异(p<0.05);单独应用TSA或TRAIL处理的细胞p65蛋白有部分核内移位,而两种药物联合应用导致p65蛋白表达量降低,并且发生明显的核内转移和集聚.
结论:低浓度TSA能够增加肝癌Bel7402细胞对TRAIL的敏感性;其机制可能是两种药物联合应用降低p65的表达和活性,从而诱导Bel7402细胞凋亡.
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