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APETALA2(AP2)亚家族转录因子主要参与植物的生长发育过程,如调控花、分生组织、胚珠和种子发育等.AP2基因属于花发育模型中的A类基因,参与花瓣发育调控,同时其自身表达又受到miR172的调控,miR172是通过对AP2基因的切割作用来调控的.竹子开花的调控一直倍受关注,借助分子生物学手段从分子水平揭示其调控机制己成为研究热点.为揭示miR172和AP2基因在竹类植物中的表达调控情况,以开花麻竹(Dendrocalamus latiflorus)为试材,开展了研究.采用RT-PCR和RACE技术克隆得到AP2同源序列cDNA全长,命名为DlAP2.序列分析表：DlAP2基因cDNA全长1729 bp,包含5’端非编码区81 bp、开放阅读框1464 bp、3’端非编码区160 bp及24个碱基的PolyA尾巴,在编码框靠近3’端130 bp处有一个高度匹配miR172结合位点(CTGCAGCATCATCAGGATTCT).DlAP2编码一个487 aa的蛋白,预测的蛋白分子量为52.75 kDa,理论等电点为6.859.该蛋白与来自其它单子叶植物的AP2蛋白均有着较高同源性,其中与毛竹的AP2 (AGH68972) -致性最高(84.6％),与模式植物水稻的转录因子AP2D23-Iike (AAW78371)、拟南芥ARGET OF EARLY ACTIVATION TAGGEDI(T NP_001189625)的一致性分别为75.1％和49.6％.该蛋白具有两个AP2结构域,属于AP2／ERF家族AP2亚家族的AP2组.基于miRNA成熟序列的保守性,根据毛竹(Phyllostacys edulis)含有miR172颈环结构的基因组序列设计特异性引物,以麻竹基因组DNA为模板,进行PCR扩增.经过测序获得了80 nt的核苷酸序列,采用RNA Structure 4.6软件分析结果显示,具有典型的发夹二级结构,且成熟序列完全位于5’端,获得了该颈环结构对应的前体核苷酸序列,即麻竹miR172的前体序列.采用茎环引物法设计茎环引物和通用引物对miR172的表达进行定量分析,结果表明在1.0 cm花芽、1.5 cm花芽、2.0 cm花芽、开花幼枝、开花枝条顶端叶片、开花植株未开花枝条顶端叶片和未开花植株叶片中miR172的表达量呈现逐渐下降的趋势,其中在1.0 cm花芽中的表达丰度最高,未开花植株叶片中的表达丰度最低,而开花枝条顶端叶片和开花植株未开花枝条顶端叶片中的表达丰度相接近.采用实时定量PCR对DlAP2基因的表达分析结果表明：与miR172的表达相应,DlAP2基因在不同组织中的表达呈现恰好相反的趋势,在1.0 cm花芽中的表达丰度最低,未开花植株叶片中的表达丰度最高,表明miR172对DlAP2基因的表达具有调控作用.