【摘 要】
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目的:用已构建好的真核表达载体pcDNA3.0-IL24转染CHO细胞,同样用已构建好的原核表达载体PET21a(+)IL-24在BL-21菌中表达,然后检测CHO上清及BL菌中表达的rhIL-24蛋白体外的抗
【机 构】
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苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室,苏州,215007
【出 处】
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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议
论文部分内容阅读
目的:用已构建好的真核表达载体pcDNA3.0-IL24转染CHO细胞,同样用已构建好的原核表达载体PET21a(+)IL-24在BL-21菌中表达,然后检测CHO上清及BL菌中表达的rhIL-24蛋白体外的抗肿瘤特性.方法:以pcDNA3.0-IL24质粒转染CHO细胞,使其上清稳定表达rhIL-24,同时抽提BL-21菌中表达的rhIL-24,用SDS-PAGE电泳和western-blotting检测rhIL-24的表达,并用MTT法、Hoechst染色和流式细胞术检测CHO细胞和BL-21菌表达的rhIL-24诱导胃癌细胞凋亡的功能,ELISA检测其刺激免疫细胞分泌IL-6及IFN-γ的活性,利用鸡胚尿囊膜检测其血管抑制作用.结果:用MTT法、Hoechest6548和流式细胞术检测表明真核表达载体pcDNA3.0-IL24转染CHO细胞后表达的产物和原核表达载体PET21a(+)IL-24转染BL-21菌后表达的产物IL-24具有较强的诱导SGC7901胃癌细胞凋亡及刺激免疫细胞分泌IL-6及IFN-γ的作用,还可抑制血管的形成.结论:rhIL-24蛋白有多重抗肿瘤能力,既能特异性的抑制肿瘤细胞的生长、促发凋亡,又能刺激免疫系统发挥免疫调控作用,还能抑制肿瘤血管生长,是目前发现的唯一一个细胞因子类的抑癌基因,在临床上有不可估量的前景.
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