化感物质黄酮抑制铜绿微囊藻生长的作用机制研究

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背景、目标和内容藻类大量繁殖,特别是由于水体富营养化而导致的藻类水华是一个世界普遍问题.水华不仅导致水产养殖业蒙受经济损失,同时也破坏水域生态景观,导致生态系统失衡,危害人体健康.近年来,植物对藻类化感抑制作用的发现和抑藻化感物质的不断分离鉴定,通过植物化感作用来控制藻类生长的研究倍受关注.黄酮类化合物是一类重要的天然植物有机化合物,有着很强的生物活性和药理活性,而且近年国内外研究和我们前期的研究直接或间接表明植物天然产物黄酮类化合物能有效抑制藻类生长.本研究化感黄酮类物质对蓝藻类生长特性的影响,对其在富营养化水体中的实际应用具有重要的指导意义。研究方法为了研究黄酮类化合物对蓝藻生长的影响,选取三种常见的黄酮类化合物5,4’-二羟基黄酮、芹菜素和木犀草素作为研究对象,分析了这三种黄酮类化合物分别对铜绿微囊藻的生长抑制作用,并且使用浮游植物荧光仪(phyto-PAM)分析黄酮类物质对蓝藻细胞的PSⅡ潜在活性(Fv/Fm)、最大相对电子传递速率(r ETRmax)和光能转化效率(α)等光合作用参数的影响情况.此外,借助流式细胞仪研究蓝藻细胞在黄酮物质胁迫下生理活性指标的动态变化研究,分别采用Di BAC4(3)荧光染色法、PI荧光染色法等检测手段对细胞膜电位、细胞膜完整性进行检测。结果和讨论实验表明5,4’-二羟基黄酮、芹菜素和木犀草素对铜绿微囊藻生长有明显的抑制作用,其半抑制浓度(EC50,5d)分别为0.47,3.85,and 1.85mg/L.其中在4 mg/L木犀草素处理下,铜绿微囊藻的PSⅡ潜在活性(Fv/Fm)、光能转化效率(α)和最大相对电子传递速率(r ETRmax)分别下降了70%,59%和44%,这说明木犀草素通过破坏细胞的光合系统来抑制蓝藻细胞的生长.而5,4’-二羟基黄酮和芹菜素会影响藻细胞的形态和细胞膜系统,在处理3天后,1mg/L的5,4’-二羟基黄酮和8mg/L的芹菜素分别会引起52%和38%藻细胞的细胞膜去极化、30%和44%藻细胞的细胞膜受损.根据分析,黄酮类化合物上不同羟基取代基会影响其对蓝藻细胞生长抑制作用和不同生理特征的影响,如黄酮分子A环上7位羟基会降低黄酮的抑藻活性,而B环3,4位上的邻位羟基会加强黄酮对藻细胞光合作用的影响.结果显示,5,4’-二羟基黄酮、芹菜素影响蓝藻细胞形态和细胞膜而木犀草素破环蓝藻细胞光合系统,在今后的研究中深入分析不同分子类型的天然黄酮类化合物"结构-抑藻活性"的内在联系,探究黄酮抑藻物质抑藻活性普遍规律,从而为藻华应急治理提供可行方式。
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