乌司他丁对LPS诱导大鼠肾血管球内皮细胞通透性及骨架蛋白的影响

来源 :中华医学会第五次全国重症医学大会论文汇编 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangyanjie123456
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目的研究乌司他丁(UTI)对LPS诱导大鼠肾血管球内皮细胞(RGECs)单层通透性及细胞骨架变化的影响。方法体外分离培养大鼠RGECs,鉴定后随机分为5组:C组(正常对照组),L组(LPS 10μg·ml-1孵育6h),U1-3组(分别以UTI200IU·ml-1、400IU·ml-1、800IU·ml-1作用于LPS 10μg·ml-1前30min,再孵育6h);采用单层细胞对白蛋白体外通透性实验测定内皮细胞通透性;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)mRNA;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测VEGF、VEGFR2蛋白;采用FITC-Phalloidin标记细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)并在激光扫描共聚焦显微镜下观察细胞骨架变化。结果与C组相比,L组内皮细胞对白蛋白的通透性明显增加(P<0.05),且RGECs高表达VEGF、VEGFR2mRNA及蛋白(P<0.05);与L组相比,U 1-3组内皮细胞通透性和VEGF、VEGFR2mRNA及蛋白的表达显著降低,且呈浓度效应趋势(P<0.05);C组内皮细胞F-actin主要分布于细胞膜侧,形成致密有序的周围束状带;L组外周致密带断裂、甚至消散,F-actin发生解聚;U组F-actin分布较紧密,解聚不明显。结论乌司他丁可以降低LPS所致的内皮细胞通透性增加,而这种保护作用可能是通过抑制LPS引起的内皮细胞过分表达VEGF、VEGFR2,并且稳定内皮细胞骨架来实现的。
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