目的:传统过继性细胞治疗方法常常因无法获得足够数量的效应细胞而难以发挥强大的杀瘤作用。用RetroNectin与抗人CD3mAb及IL-2共同刺激人PBMC,可使PBMC在体外大量增殖,无需使用血细胞分离机,仅用注射器采50-100ml患者外周血,经体外培养14天,就可获得1010供回输的效应细胞即RAK细胞。本实验对RAK细胞的增殖能力、体外免疫学活性及细胞毒作用等进行了相关研究。方法:采取患者外周血,Ficoll法分离得到PBMC,并保留自体血浆。用人RetroNectin与抗人CD3mAb及IL-2共同培养人PBMC,每2-3天补充培养基、IL-2和自体血浆。在培养的第11天及14天,取培养细胞计数并进行体外实验。用流式细胞仪测定细胞表型如CD3/CD4/CD8,CD3/CD25等;用ELISA法定量分析RAK细胞分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12。用LDH法分析RAK细胞对Raji、K562及三株肾癌细胞株的细胞毒效应。以上实验均以同时培养的CD3AK细胞作为阳性对照组。