【摘 要】
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目的:探讨硫酸酯化茯苓多糖(SP)对PCV2体外感染猪脾细胞诱发氧化应激的调节作用及其免疫活性的影响.方法:实验筛选了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)/猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和抗体均为阴性的断奶仔猪,无菌分离脾细胞进行体外培养.加入1000×TCID50 PCV2病毒悬液孵育2h后,再加入终浓度分别为400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL的
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005;南京农业大学动物医学院,江苏南京210095 南京
【出 处】
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2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会
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目的:探讨硫酸酯化茯苓多糖(SP)对PCV2体外感染猪脾细胞诱发氧化应激的调节作用及其免疫活性的影响.
方法:实验筛选了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)/猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和抗体均为阴性的断奶仔猪,无菌分离脾细胞进行体外培养.加入1000×TCID50 PCV2病毒悬液孵育2h后,再加入终浓度分别为400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL的硫酸酯化茯苓多糖.荧光法测定培养后12h和24h的脾细胞内ROS水平,并根据T-SOD和TAOC试剂盒操作说明测定培养后4h、12h和24h细胞培养上清液中超氧化岐岐化酶(T-SOD)和总抗氧化力(TAOC)活性。同时MTT法测定猪脾T/B淋巴细胞体外增殖活性;ELISA方法检测脾细胞培养上清液中IL-1β、IL-2、IL-8、IL-IO和TNF-α等细胞因子含量。
结果:SP能下调PCV2诱导脾细胞产生的过量ROS,同时提高感染PCV2的猪脾细胞T-SOD和TAOC活性。SP能协同ConA/LPS促进PCV2感染的猪脾T/B淋巴细胞体外增殖,提高PCV2感染的猪脾淋巴细胞的免疫应答能力。同时,SP能显著促进猪脾细胞分泌IL-2,浓度为50~200μg/mL的SP能显著降低PCV2感染的猪脾细胞培养上清液中IL-1β水平,同时可刺激TNF-a的分泌。
结论:SP可以通过促进猪脾T/B淋巴细胞增殖活性以及调节细胞因子的分泌,增强细胞免疫应答,发挥免疫调节作用。这与SP能降低PCV2感染猪脾细胞内ROS水平,升高T-SOD和TAOC的活性以提高细胞的抗氧化应激能力并保护免疫细胞的作用有关。
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