流式细胞术在免疫学中的应用

来源 :第二届中国免疫学会青年学者论坛论文集 | 被引量 : 3次 | 上传用户:zhochg
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内容:流式细胞术是目前生物医学领域的一个强大的技术,已经广泛的应用于生物医学的各个领域,尤其在细胞免疫学应用更加广泛,可以说已经成为细胞免疫学研究的一个不可或缺的技术。流式细胞术主要可以分为流式分析和流式分选两个方面。流式分析不仅能够分析细胞的各种物理化学特性,而且还能够用于定量分析分子。流式分析在免疫学中的应用主要包括表型检测、细胞因子检测、淋巴细胞增殖检测、细胞凋亡检测、CTL和NK细胞杀伤功能检测、吞噬功能检测、胞内磷酸化信号分子检测等方面。细胞因子检测有胞内染色检测法和CBA法两种;淋巴细胞增殖检测有相对计数法、示踪染料(CFSE)标记法和Brdu掺入法等;细胞凋亡检测主要是Annexin V/PI双染法;杀伤功能就是通过检测凋亡和坏死的靶细胞的比例实现;吞噬功能通过检测目标细胞吞噬FITC偶联的Beads的比例实现;应用流式的方法检测细胞内磷酸化信号分子相比于Western经典方法具有明显的优势。目前细胞分选主要有流式分选和磁珠分选两种,相比较而言,磁珠分选对细胞损伤要小、操作简便、费用低,但是一般只能根据一种表型分选、只能分选高表达群,低比例细胞分选效果差;而流式分选能够根据多种表型分选、能够同时进行四路分选、能够分选低表达群和低比例细胞。流式分选和磁珠分选各有优点,应根据实际情况选用,而且有时还可以联合应用这两种分选方法。
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