长期有氧运动对心肌和骨骼肌p70S6K和4EBP1信号表达的影响

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目的:通过观察长期的有氧运动对不同肌肉的促肥大效应,探讨p70S6K和4EBP1信号分子在心肌和骨骼肌中的作用机制,试图为不同组织中重要的促合成反应的信号转导机制提供理论支持。方法:7周龄雄性SpragueDawley大鼠30只随机分组为安静组(n=6)和有氧运动组(n=24),其中运动组分为4个不同的取材时间点(末次运动后即刻,6h,12h和24h),运动方案采取均以15m/min,15min的初始运动负荷,每隔2d速度增加5m/min,时间增加5min,至达到28m/min,60min的递增负荷跑台运动,训练7周,每周训练5天,休息2天。每周及最后取材前称体重,以5ml/kg,20%乌拉坦腹腔麻醉,腹主动脉取血后,取心脏及腓肠肌并测其重量,心脏分离左心室肌,各组织锡纸分装好后存于-70℃保存,留作匀浆用。BCA法测定总蛋白含量,Westernblot测定心肌与腓肠肌p70S6K和4EBP1的磷酸化及总蛋白表达情况,并测腓肠肌MHC蛋白表达情况。QuantityOne软件进行图像分析,得出目的条带的光密度值。将每一个目的条带与相应的内参条带GAPDH的光密度值进行比较,以安静组的蛋白的相对含量为1,实验组目的蛋白相对含量与对照组目的蛋白的相对含量进行比较,计算得出与对照组的比值。数据处理采用SPSS16.0统计软件进行分析,以均数±标准差表示,组间比较采用单因素方差分析。显著性检验水平以P<0.05表示具有显著性差异。结果:在心肌中,有氧运动组心系数(心脏重量/体重)对安静组相比显著升高(P<0.05);运动后p70S6K(Thr389)的磷酸化水平在即刻和6h无明显变化,而在12h后达到峰值并有显著差异(P<0.05),在24h仍显著高于安静组;4EBP1(Thr37/46)的磷酸化水平在运动后即刻显著升高达到峰值(P<0.05),但在随后的三个时间点呈下降趋势且与安静组比无显著差异。腓肠肌中,有氧运动后腓肠肌湿重相对值与安静组相比无显著性差异;MHC呈增长趋势,但与安静组相比亦无显著差异;p70S6K(Thr389)的磷酸化水平在运动后6h显著增加(P<0.05),4EBP1(Thr37/46)的磷酸化水平在即刻、6h和12h均出现显著增加(P<0.05)且峰值出现在运动后6h。结论:长期有氧运动诱导了心肌的肥大反应,但未明显引起骨骼肌肥大;p70S6K和4EBP1在两种肌肉组织中均被有氧运动激活,但表现出不一致的时程变化。
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