合作小型猪T细胞受体α链的基因结构及其多样性研究

来源 :中国西部第十二届实验动物管理与学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dna0716
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以公开的人类、小鼠和猪TCRα链基因为参考序列,用RT-PCR法从健康的合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中克隆了93个猪TCR α基因(简称STA).测序分析表明,克隆的猪TCRα链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的J区和恒定的C区的基因片段,但其基因序列间的核苷酸组成都不完全相同,且具有十分复杂的多态性和多样性,基因间的同源性在68.4%~98.7%,这与 TCR α链的基本基因结构特征相一致.同时依据TCR α基因的同源性进行了遗传演化关系分析和归类分析,并在核苷酸和氨基酸水平上对其信号区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区和CDR3进行了结构分析,在各个区域发现了一些变异集中点和变异热点区.用IMGT/V-QUEST软件的分析方法,将合作小型猪TCR α V区(STAV)、J区(STAJ)基因片段与人类的进行相似性比较和归类分析,发现合作小型猪TCR α与人类的遗传演化关系较近,每个序列都能找到人类对应的TRAV、TRAJ基因片段,甚至高变区V区的相似性可达92%以上.以上研究表明,近交培育的合作小型猪在健康状态具有应对外界复杂微生物等环境的TCR多样性分子遗传基础,且适合作为人类免疫学及疾病研究动物模型.
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目的:RT-PCR扩增猕猴黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因片段,为进一步开展相关研究提供实验资料.方法:提取健康猕猴新鲜脏组织总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,对获