茯苓免疫调节蛋白PCP之纯化与生理活性之探讨

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茯苓(Wolfiporia cocos)爲我国重要藥用簟菌之一。本研究以茯苓菌核爲材料,經由茯苓原料破碎、硫酸铵蛋白沉澱及透析所得粗蛋白質萃取液後,再以DE-52陰離子交换及FPLC層析纯化濃缩而得茯苓免疫調節蛋白PCP。膠體過濾管柱層析顯示,茯苓蛋白PCP分子量约35.6 kDa;經蛋白質膠體電泳分析测得茯苓蛋白PCP具兩個單元蛋白,其分子量約爲14.3 kDa及20.3 kDa。體外免疫調節試驗發現,茯苓蛋白PCP可以直接活化RAW 264.7巨噬细胞分泌nitric oxide(NO)舆TNF-α,均有顯著的成效,亦可提高巨噬细胞之iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12以及IL-18 mRNA表现,並排除茯苓蛋白PCP受到LPS 污染的可能性。此外,茯苓蛋白PCP可刺激小鼠淋巴细胞之增生及提高细胞激素IFN-γ分泌量;流式细胞分析结果顯示,茯苓蛋白PCP能藉由提高淋巴细胞S及G2/M時期细胞比例,以達到促進T细胞及B 细胞之增生,並可調節IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ的mRNA表現量。综合本研究試驗结果得知,茯苓蛋白爲免疫刺激物,可以提昇宿主相關免疫反虑,極具醫藥及臨床發展之潜力。
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