【摘 要】
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目的 通过微透析的方法研究大鼠在肠道术后海马内5-羟色胺(HT)动态变化,观察海马内5-HT代谢有关的主要基因的转录,结合旷场实验对大鼠的疲劳进行评估,阐述术后疲劳综合征(POFS)的中枢机制,并探索亮氨酸(Leu)对术后疲劳的改善作用.方法 本实验采用体重为410g-450g的SPF级成年雄性SD大鼠,手术方式为“70％中段小肠切除+端端吻合术”,分为微透析组(32只)和常规组(128只),干预
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院胃肠外科,浙江温州325000 同济大学附属第十医院(上海市第十人民医院)
【出 处】
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中华医学会肠外肠内营养学分会第八届全国肠外肠内营养学术大会
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目的 通过微透析的方法研究大鼠在肠道术后海马内5-羟色胺(HT)动态变化,观察海马内5-HT代谢有关的主要基因的转录,结合旷场实验对大鼠的疲劳进行评估,阐述术后疲劳综合征(POFS)的中枢机制,并探索亮氨酸(Leu)对术后疲劳的改善作用.方法 本实验采用体重为410g-450g的SPF级成年雄性SD大鼠,手术方式为“70％中段小肠切除+端端吻合术”,分为微透析组(32只)和常规组(128只),干预手段为亮氨酸(Leu)以16.5g/L的浓度,每日18ml/kg的剂量,从术前1天开始直至术后第7天,分早、中、晚三次行腹腔注射.将32只雄性SD大鼠行海马区颅内置管并随机分为正常组(N组)、假手术组(S组,开关腹手术)、模型组(M组,70％小肠切除术)、亮氨酸干预组(C组,M组基础上用Leu治疗),每组8只大鼠.术后第1、3、5、7天分别观察其行为学变化；术后当天及第1、3、5、7天微透析法收集大鼠海马组织间隙的透析液,高效液相法检测其中5-HT浓度.将128只常规组SD大鼠随机分为：正常组(N组)、模型组(M组)、假手术组(S组)、亮氨酸干预组(C组),每组32只,每组再分为术后1、3、5、7天组,每小组8只.术后第1、3、5、7天取海马组织,用于PCR测色氨酸羟化酶(TPH)-1、TPH-2、5-HT1A受体(R)基因(Htr-1a)的转录情况.结果 旷场实验结果显示,微透析组中M和S组在第1、3、5日均较N组有明显变差(P＜0.05),术后第5日和第7日,C组较M组有了明显的好转(P＜0.05).普通组中只有S1天组明显下降(P＜0.05)；而M1、3、5天组均较N组明显下降(P＜0.05),C5、7天组则显著高于M5、7天组(P＜0.05),5-HT浓度显示S、M、C这3组变化趋势均相似,手术当天升至最高,第1日回落,第3日再次升高,第5、7日逐渐降至正常水平.术后第3、5、7日M组海马内5-HT均较C组高,差异有统计学意义(P＜0.05).Realtime qPCR结果显示：TPH-1的转录水平只有C3、5、7天组明显升高(P＜0.05),其余均与N组一致.TPH-2的转录在S、M、C组第3日均明显升高(P＜0.05),C组介于M组和S组之间；第5日,M组和C组均较前有明显下降(P＜0.05),C组较M组下降更加明显(P＜0.05)；第7日,M、C组均升高,C组较M组更低(P＜0.05).Htr-1a在每组的第3日均有明显升高(P＜0.05),第5日又较第3日明显下降(P＜0.05),第7日又降回术后第1日水平；C组在术后第3日和第5日均较M、S组有明显下降(P＜0.05).结论 手术应激对中枢海马5-HT的代谢有着重要的影响,可干涉其合成、分泌过程,并使之受体产生变化,亮氨酸(Leu)的单营养素额外支持供给,可明显改变海马5-HT的代谢,一定程度上增强实验动物的活动能力,起到抗疲劳作用.
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