【摘 要】
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目的 为获得持续高表达血管内皮生长因子165(VEGF165)及骨形态发生蛋白2(BMP-2)双基因的犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)，观察慢病毒载体介导VEGF165/BMP-2基因对犬BMSCs的转染及其表达情况。方法 取1周岁比格犬骨髓，分离培养犬BMSCs；构建携带VEGF165、BMP-2和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒表达载体，利用293T细胞包装、生产携带VEGF165、BM
【机 构】
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宁波大学医学院 宁波市第六医院脊柱外科
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的 为获得持续高表达血管内皮生长因子165(VEGF165)及骨形态发生蛋白2(BMP-2)双基因的犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)，观察慢病毒载体介导VEGF165/BMP-2基因对犬BMSCs的转染及其表达情况。方法 取1周岁比格犬骨髓，分离培养犬BMSCs；构建携带VEGF165、BMP-2和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒表达载体，利用293T细胞包装、生产携带VEGF165、BMP-2和GFP 基因的重组慢病毒(Lv-BMP、Lv-VEGF、Lv-GFP)，分成未转染组、VEGF165组、BMP-2以及双基因联合转染组四组分别转染第三代犬BMSCs；与转染后7d用RT-PCR检测各组BMSCs中VEGF165、BMP-2 mRNA表达；与转染后5d、28d用Western blot法检测BMSCs中VEGF165、BMP-2的蛋白表达情况；运用MTT法测定转染后各组BMSCs生长情况并绘制生长曲线。
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