【摘 要】
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目的:传统用于人参皂苷分析的HPLC方法需要比较长的时间,为了开发出更快的方法,采用Agilent的1290方法开发系统及配套的方法筛选软件筛选了色谱柱及相关的色谱条件,用以发现色谱柱及色谱条件的一些规律.依照此规律开发出更快、更好的色谱方法.方法:方法开发系统及方法筛选软件是基于Agilent公司的1260或1290系列HPLC/U HPLC仪器根据不同需求增加不同切换阀、柱温箱构成.利用方法筛
【机 构】
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安捷伦科技中国有限公司液相色谱应用部,北京100102 安捷伦科技中国有限公司
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目的:传统用于人参皂苷分析的HPLC方法需要比较长的时间,为了开发出更快的方法,采用Agilent的1290方法开发系统及配套的方法筛选软件筛选了色谱柱及相关的色谱条件,用以发现色谱柱及色谱条件的一些规律.依照此规律开发出更快、更好的色谱方法.方法:方法开发系统及方法筛选软件是基于Agilent公司的1260或1290系列HPLC/U HPLC仪器根据不同需求增加不同切换阀、柱温箱构成.利用方法筛选软件对多根色谱柱(最多8根)及多个色谱条件进行排列组合,在无人照管的情况下自动完成分析任务.方法筛选软件能根据谱图中色谱峰数量、分离度及保留时间等方法开发所关注的参数生成报告.根据筛选的结果,我们发现Agilent的Bonus RP色谱柱对人参皂苷的Re及Rg1有独特的选择性.另外;发现温度对人参皂苷Re及Rg1选择性的影响也很大.结果:以此为基础,我们用Bonus RP色谱柱开发了分析时间仅6min的UHPLC方法.在初步的方法开发完成之后,做了一些实际的样品;其中包括了不同种类的人参、三七提取液;成方或制剂,而后又根据这些实际样品的结果做了进一步的方法优化,使这种方法对大多数样品都能有很好的分离能力及重现性.根据Be及Rg1的选择性受温度影响的现象,我们开发了另一种方法,使用Agilent SB-C18柱、提高温度;分析在10-12min之内完成.由于使用线性梯度,Re及Rg1这2个峰后面的其他人参皂苷的色谱峰能有更好的分离度,可以满足那些需要分析更多种类人参皂苷的需求.结论:两种方法的分离度及重现性都非常好,能够充分发挥UHPLC的分离能力.Agilent的方法筛选软件可以快速、不用人照管地选择最佳的色谱柱、色谱条件;使方法开发的步骤更趋系统化,更为合理.
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