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植物来源的天然产物曾是药物或其先导化合物的主要来源,但因天然植物生长缓慢、活性成分含量低,致使这类化合物的来源难以得到保障,难以满足现实需求.大蒜作为一种可食用或供调味,亦可入药的重要经济作物,关于它的分生组织细胞的分离及培养目前尚未见报道。本实验提供了一种大蒜鳞茎分生组织细胞分离及培养方法。
大蒜鳞茎分生组织细胞分离:将大蒜鳞茎用流水冲洗干净后,在超净工作台内,剥去蒜皮,无菌水冲洗2次;75%乙醇消毒1min,然后用无菌水冲洗2次,再用0.1%升汞浸泡10min,再无菌水冲洗3后,用解剖刀沿纵轴切开蒜瓣、切取基部分生组织细胞,接种于培养基上。
大蒜鳞茎分生组织细胞培养:以去硫酸铵的1/2 B5培养基为基础,添加毒莠定,活性碳,赤霉素,抗坏血酸,柠檬酸,甘氨酸,脯氨酸,天冬氨酸,精氨酸。固体培养基添加一定量的结冷胶培养条件:25℃下黑暗培养,首次培养一个月后,每两周继代一次。本实验建立的大蒜鳞茎分生组织细胞的分离及培养方法,主要目的是建立植物细胞银行,这不仅可以为植物细胞培养的稳定性提供一个切实有效的解决方法,而且将在植物种质资源的保存方面发挥关键作用。