【摘 要】
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[目的]研究微囊藻毒素(microcystins,MCs)对SD大鼠睾丸生殖细胞促凋亡作用的机制,为保护、预防和治疗MCs所致的生殖系统损伤提供科学依据.[材料和方法]分离并纯化SD大鼠
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系,郑州450001
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]研究微囊藻毒素(microcystins,MCs)对SD大鼠睾丸生殖细胞促凋亡作用的机制,为保护、预防和治疗MCs所致的生殖系统损伤提供科学依据.[材料和方法]分离并纯化SD大鼠睾丸支持细胞,建立原代培养的睾丸支持细胞模型.CCK-8试剂盒检测不同浓度MC-LR作用睾丸支持细胞24h后细胞增殖变化,并确定IC50,选定IC50/4、IC50/2、IC50为后续实验浓度.睾丸支持细胞分为：对照组(0 μ g/ml MC-LR)、IC50/4、IC50/2、IC50 MC-LR组和Caspase抑制剂zVADfmk (50 μ mol/L)+IC50 MC-LR组以及抗氧化剂NAC(10mmol/L)+IC50 MC-LR组,继续培养24 h.AnnexinV-FITC/PI双染联合流式细胞仪检测各处理组作用睾丸支持细胞24h后细胞凋亡率的变化.荧光显微镜以及流式细胞仪分别检测不同浓度MC-LR和NAC+IC50 MC-LR作用睾丸支持细胞24h后细胞内ROS荧光值变化.JC-1法联合流式细胞仪检测不同浓度MC-LR和NAC+IC50MC-LR作用睾丸支持细胞24h后细胞线粒体膜电位变化利用Western Blot法检测不同浓度各处理组作用睾丸支持细胞24h后细胞内细胞色素C、Caspase-9、Cleaved-Caspase-9以及Caspase-3蛋白相对表达量变化.[结果]不同浓度MC-LR作用睾丸支持细胞24h后,细胞增殖受到明显抑制,且随着MC-LR浓度升高,细胞增殖抑制率明显升高(p＜0.05).经计算MC-LR作用睾丸支持细胞24h IC50为32 μg/ml.随着MC-LR浓度升高,细胞凋亡率显著升高(p＜0.05).
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